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pHyVec4
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pHyVec4質(zhì)粒是使用廣泛的基因操作工具，可以進(jìn)行編碼基因、microRNA、lncRNA的功能研究、啟動子活性、轉(zhuǎn)錄因子及3’UTR調(diào)控研究等。
質(zhì)粒名稱：pHyVec4
質(zhì)粒規(guī)格：2ug
實驗步驟:
)質(zhì)粒提取
.0,000min離心收集.5-5ml菌液沉淀于.5ml離心管中
2.加入00溶液,振蕩至*懸浮
3.加入200溶液2,立即輕柔顛側(cè)離心管6次,使菌體充分裂解,隨后將離心管冰上放置
3分鐘
4.加入50山溶液3,立即溫和顛倒離心管數(shù)次,冰上放置3分鐘,0,00g離心0mins
5.將步驟4的上清轉(zhuǎn)移至新的離心管(盡量去除雜質(zhì)),加入等體積的/氖仿/異成醇混
合均勻0,000離心5min
將步驟5的上清轉(zhuǎn)移至新的離心管,加入2倍體積的無水乙醇,室溫放置5-omin,沉
降DNA
7.0000g離心0分鐘,棄乙醇,保留沉淀,加入ml706的乙醇洗滌沉淀,0,000離
心5分鐘
8.倒掉乙醇溶液,用吸水紙吸凈管壁上的水珠,室溫蒸發(fā)痕量乙醇
9.加入適量含 Rnase的TE或滅菌雙蒸水溶解質(zhì)粒DNA
2)質(zhì)粒鑒定瓊脂糖礙膠電泳
灌膠:膠中加入芡光染料< SYBR Green)
加樣:質(zhì)粒+上樣緩沖液→混勻
電泳
結(jié)果觀察:UV燈下
pHyVec4實驗分析：
裂解細(xì)胞中除含有質(zhì)粒DNA外,還含有基因組DNA、各種RNA、蛋白質(zhì)和脂類等物質(zhì),因
用堿裂解法除去雜質(zhì)
、防止DNA裂解: Solution
)、所含糖增加溶洨黏度,維持滲透壓,防止DNA受機(jī)械剪切作用降解
?
00427-20030 含量測定 50mg
00428-20040 HPLC含量測定 50mg
00429-20040 HPLC含量測定 50mg
00430-20050 含量測定 00mg
0043- 尿蘘素 50mg
00432-20040 枸櫞酸噴妥維林 含量測定 50mg
00433-20030 HPLC含量測定 50mg
00434-20030 (尼古酸） 含量測定 50mg
00435-20070 硝基呋喃丙烯酰胺(呋喃丙胺雜質(zhì)A） 檢查用 00mg
00437-20060 甲氧沙 含量測定 00mg
00438-20040 異煙() UV法溶出度檢查 00mg
00439-20030 含量測定 50mg
00440-20030 TCL法檢查 50mg
0044-20040 溶出度檢查 50mg
